Pozbawienie cząsteczek warstwy hydratacyjnej i wytrącenie cząsteczek białek w wyniku łatwiejszego kontaktu pomiędzy niepolarnymi grupami sąsiadujących cząsteczek
Białka najtrudniej ulegają wysoleniu w pH równym punktowi izoelektrycznemu (takie pH przy którym wypadkowy ładunek cząstek białkowych = 0)
Substancje których rozmiar jest mniejszy od porów napęczniałych ziaren żelu nie penetrują do wnętrz i przepływają przez kolumnę i są eluowane jako pierwsze
Należy unikać żeli w których izolowane białko wypływa w skrajnych pozycjach eluatu (na początku ponieważ rozdział trwa długo i jest spore prawdopodobieństwo utraty białka i na końcu, bo wymieszane jest z innymi białkami o zróżnicowanych masach i właściwościach
W wymianie anionowej między jonitem i roztworem wymieniane są równoważne ilości jonów dodatnich, a w kationowej - jonów ujemnych
Mechanizm polega na konkurowaniu pomiędzy związanym białkiem, a jonami Cl- o wiązanie obdarzone ładunkiem ujemnym wypełnieniem kolumny
Polega na nieodwracalnej wymianie wszystkich zdonych do wymiany jonów jonitu na joby obce w roztworze
W zależności od waryości pK wymieniach jest zaliczany do np. silnych z silnie polarnymi grupami funkcyjnymi i są słabo zdysocjowane
Białka o małej gęstości przypadkowych ładunków ujemnych będą wypływać z kolumny w pierwszej kolejności, a o zwiększającej się gęstości coraz później
I sączenie i ch. jonowymienna wymagają krótkich kolumn i małej ilości materiału. Dlatego są wykorzystywane jako wstępne etapy preparatyki
Kolejne etapy: 1) Naniesienie mieszaniny białek na kolumnę chromatograficzną 2) Adsorpcja białek o odpowiednich ładunkach 3) Regeneracja jonitu 4) Elucja białek związanych do złoża
Ligand unieruchomiony na rozpuszczalnym nośniku musi wykazywać powinowactwo do oczyszczonego materiału biologicznego
Wykorzystuje brak selektywności makromolekuł biologicznych w kompleksowaniu innych cząsteczek z wysoką selektywnością
Technika ta polega na przepuszczaniu mieszaniny białka przez kolumnę wypełnioną nośnikiem do którego zostały przyłączone specyficzne grupy funkcyjne
